Мегасфера спп у мужчин

С.В. Чигринец 1, 2 , Г.В. Брюхин 1

1 ФГБОУ ВО «Южно-Уральский государственный медицинский университет» Минздрава России; Россия, 454092 Челябинск, ул. Воровского, 64;
2 ООО «ДНК клиника»; Россия, 454048 Челябинск, ул. Яблочкина, 3

Бесплодие – важная медико-социальная проблема. Известно, что мужской фактор (патозооспермия – нарушение качества эякулята) выявляют примерно в 50 % бесплодных пар, причем на долю идиопатической формы мужского бесплодия приходится не менее 30 %, а доля бессимптомной урогенитальной инфекции, по данным E. Nieschlag [1], составляет 8 %. Среди вероятных причин идиопатической формы бесплодия рассматриваются: генетические факторы, воздействие активных форм кислорода и эндокринных дисрапторов [1].

Связь условно-патогенной урогенитальной инфекции с качеством эякулята широко изучается в настоящее время с помощью полимеразной цепной реакции, хроматографии с масс-спектрометрией или высокопроизводительного секвенирования (next-generation sequencing) [2–4]. Хорошо известна роль условно-патогенных микроорганизмов в метаболизме ксенобиотиков [5, 6], а также их способность вызывать гибель клеток, в частности апоптоз сперматозоидов [7–9]. Вместе с тем отсутствуют убедительные данные о том, при каких условиях условно-патогенная микрофлора урогенитального тракта способна оказывать влияние на качество эякулята и становиться причиной мужской субфертильности или инфертильности.

Влияние на качество эякулята убиквитарных эндокринных дисрапторов, к которым относятся бисфенол А и триклозан, активно обсуждается в научной литературе [10–12]. Однако нам не встретились публикации, посвященные изучению связи между микробиотой урогенитального тракта, эндокринными дисрапторами и фертильностью мужчины.

Цель исследования – установить связь между наличием условно-патогенных микроорганизмов уретры и качеством эякулята, а также концентрацией убиквитарных эндокринных дисрапторов (бисфенола А и триклозана) в семенной жидкости.

Материалы и методы

С октября 2017 г. по сентябрь 2018 г. на базе «ДНК клиники» (Челябинск) проведено обсервационное одноцентровое одномоментное (поперечное) неконтролируемое исследование с участием 63 мужчин. Пациенты обратились в клинику для выполнения спермиологического анализа по поводу бесплодия в браке, невынашивания беременности партнершей, а также для планирования беременности или донорства спермы. Все пациенты были жителями Челябинска или Челябинской области

Критерии включения в исследование: мужской пол, возраст 20–40 лет, наличие идиопатической формы бесплодия, наличие репродуктивных потерь у супружеских пар с патозооспермией, бессимптомный дисбиоз уретры, планирование беременности супружескими парами с нормозооспермией, участие в донорстве спермы, информированное добровольное согласие на включение в исследование.

Критерии исключения из исследования: варикоцеле, инфекционно-воспалительные заболевания урогенитального тракта, вызванные патогенными и/или условно-патогенными микроорганизмами, лейкоспермия, MAR-тест >10 % по данным спермограммы, азооспермия, гипогонадизм и другие эндокринные заболевания, онкологические заболевания любой локализации, ВИЧ-инфекция, системные заболевания, отсутствие информированного добровольного согласия на включение в исследование.

Проводили лабораторное исследование эякулята и содержимого уретры. Эякулят собирали после 3–4 дней воздержания от семяизвержений. Забор содержимого уретры для исследования на наличие инфекции и воспаления осуществляли не менее чем через 3 ч после последнего мочеиспускания. Для исключения патологий органов мошонки (варикоцеле и др.) выполняли ультразвуковое исследование органов мошонки на аппарате Mindray DC-7 (Китай) в положении пациента лежа и стоя во время андрологического приема.

Лечитесь ли Вы сами и своих детей или ходите сразу к врачу?
Сразу идем к врачу, потому что может быть что симптомы одинаковы, а болячка разная.
54.24%
Сами смотрим, изучаем и лечимся сами.
27.12%
Только если свое лечение не помогло или не очень, только тогда идем к врачу.
18.64%
Проголосовало: 118

У всех пациентов проведено спермиологическое исследование с оценкой общего количества, концентрации, подвижности, морфологии сперматозоидов по Крюгеру. Спермиологическое исследование выполняли в соответствии с рекомендациями Всемирной организации здравоохранения (2010) [13]. Заключение о наличии нормозооспермии или патозооспермии основывали на критериях, изложенных в тех же рекомендациях [13].

По результатам оценки качества 63 образцов эякулята мужчины были распределены по 2 группам: в 1-ю вошли пациенты с нормозооспермией (n = 27), во 2-ю – с патозооспермией (n = 36).

  • «нормальная микрофлора» (Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Corynebacterium spp., а также были включены Lactobacillus spp.);
  • «условно-патогенные микроорганизмы, ассоциированные с бактериальным вагинозом» (Gardnerella vaginalis, Megasphaera spp./Veilonella/Dialister spp., Sneathia spp./Leptotrichia spp./Fusobacterium spp., Ureaplasma parvum, Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma hominis и Atopobium cluster);
  • «условно-патогенные анаэробы» (Anaerococcus spp., Bacteroides spp./Porphyromonas spp./Prevotella spp., Peptostreptococcus spp./Parvimonas spp., Eubacterium spp.).

Haemophilus spp., Pseudomonas aeruginosa/Ralstonia spp./ Burkholderia spp., Enterobacteriaceae spp./Enterococcus spp., а также Candida spp. ввиду их малочисленности в изучаемых образцах не позволили сформировать отдельный кластер и поэтому в статистический анализ не вошли.

Концентрацию бисфенола А и триклозана в семенной жидкости определяли на газовом хроматографе с масс-спектрометром Shimadzu GCMS-QP2010 Ultra (Shimadzu Corporation, Япония). Данные обрабатывали с помощью программы GCMSsolution 4.3 (Shimadzu Corporation, Япония).

Среди 63 пациентов, которые приняли участие в исследовании, было 27 (42,9 %) мужчин с нормозооспермией (планирующих беременность в браке или доноров спермы) и 36 (57,1 %) мужчин с идиопатической формой бесплодия и/или репродуктивными потерями в супружеской паре с различными вариантами патозооспермии: тератозооспермией – в 18 (50 %) случаях, астенотератозооспермией – в 12 (33,3 %), олиготератозооспермией – в 4 (11,1 %), олигоастенотератозооспермией – в 2 (5,6 %).

Средний возраст пациентов (М ± σ) составил 30,8 ± 3,6 года, средний индекс массы тела (ИМТ) (М ± σ) – 25,4 ± 2,9 кг/м2 , при этом 42 % мужчин имели избыточную массу тела (ИМТ 25–30 кг/м2 ) и 11 % – ожирение I степени (ИМТ >30 кг/м2 ). Группы пациентов с нормо- и патозооспермией были сопоставимы по возрасту, длительности воздержания от семяизвержений, ИМТ, статусу курения и приема алкоголя.

В 100 % образцов эякулята был обнаружен бисфенол А с медианной концентрацией 0,150 (0,060– 0,310) нг/мл. Триклозан был выявлен в 84,9 % образцов эякулята с медианной концентрацией 0,125 (0,050– 0,220) нг/мл.

Группы статистически значимо различались по концентрации бисфенола А (p 0,1), за исключением Atopobium cluster (p = 0,031), входившего во 2-й кластер.

Обращает на себя внимание тот факт, что у мужчин с патозооспермией частота выявления микробиоты 1-го кластера (Lactobacillus spp., Staphylococсus spp. и Corynebacterium spp.) была несколько выше, чем у мужчин с нормозооспермией. Микроорганизмы, включенные во 2-й кластер (Gardnerella vaginalis, Megasphaera spp./Veilonella/Dialister spp., Sneathia spp./Leptotrichia spp./Fusobacterium spp., Ureaplasma parvum, Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma hominis и Atopobium cluster), встречались чаще у мужчин с нормозооспермией, тогда как микроорганизмы 3-го кластера (Anaerococcus spp., Bacteroides spp./Porphyromonas spp./ Prevotella spp., Peptostreptococcus spp./Parvimonas spp., Eubacterium spp.) несколько чаще встречались у мужчин с патозооспермией.

С помощью коэффициента ранговой корреляции Спирмена между концентрацией бисфенола A, триклозана в семенной жидкости и частотой выявления микроорганизмов в уретре у мужчин были обнаружены следующие статистически значимые корреляционные связи (табл. 2).

Таблица 2. Статистически значимые корреляционные связи между концентрацией бисфенола А, триклозана в семенной жидкости и обсемененностью уретры микроорганизмами

Эндокринный дисраптор Микроорганизм Корреляционная связь r p
Бисфенол А Lactobacillus spp 0,501 0,003
Corynebacterium spp. 0,425 0,015
Anaerococcus spp. 0,371 0,037
Eubacterium spp. 0,357 0,045
Триклозан Staphylococсus spp. 0,392 0,026
Streptococcus spp. –0,486 0,005

В данном исследовании был использован метод полимеразной цепной реакции в режиме реального времени для характеристики разнообразия микробиоты уретры. Результаты показали отсутствие статистически значимых различий между группами мужчин с нормозооспермией и патозооспермией по составу микробиоты уретры. D. Hou и соавт. (2013) также не обнаружили статистически значимых различий при сравнении микробиоты у доноров спермы и бесплодных мужчин [14]. В их работе была выявлена отрицательная статистически значимая корреляция между качеством эякулята и наличием Anaerococcus, но в нашем исследовании Anaerococcus spp., наряду с другими анаэробными микроорганизмами (Bacteroides spp./Porphyromonas spp./Prevotella spp., Peptostreptococcus spp./Parvimonas spp., Eubacterium spp.), также встречался чаще у мужчин с патозооспермией, хотя связь и оказалась статистически незначимой. S.-L. Weng и соавт. [2] продемонстрировали положительную статистически значимую корреляцию качества эякулята с наличием Lactobacillus и Gardnerella vaginalis и отрицательную – с наличием Prevotella, что подтвердилось и в нашем исследовании. Из микроорганизмов, традиционно выявляемых в микробиоценозе влагалища, статистически значимо чаще в уретральном микробиоценозе у мужчин с нормозооспермией присутствовала Atopobium cluster.

Исходя из этого, следует предположить, что условно-патогенные микроорганизмы, ассоциированные с бактериальным вагинозом, можно рассматривать при дальнейшем изучении микробиоты урогенитального тракта у мужчин как биомаркеры хорошего качества эякулята, а условно-патогенные анаэробы – наоборот, как биомаркеры низкого качества эякулята. Вместе с тем в ходе исследования была обнаружена тенденция к повышению уровня общей бактериальной обсемененности уретры с сокращением ее видового разнообразия у мужчин с патозооспермией, что согласуется с данными других авторов [4]. В нашей работе впервые была описана статистически значимая связь между концентрацией бисфенола А, триклозана в семенной жидкости и характеристиками микробиоты уретры. В некоторых публикациях также было показано отрицательное влияние эндокринных дисрапторов на микробиоту организма человека [6, 15].

В ходе исследования установлены статистически значимые различия в концентрации бисфенола А и триклозана в семенной жидкости у мужчин с нормо- и патозооспермией. Обнаружены статистически значимые положительные корреляции между концентрацией бисфенола А в семенной жидкости и наличием вмикробиоте уретры Lactobacillus spp. (r = 0,501, р = 0,003), Corynebacterium spp. (r = 0,425, р = 0,015), Anaerococcus spp. (r = 0,371, р = 0,045), Eubacterium spp. (r = 0,357, р = 0,037). В отношении концентрации триклозана в семенной жидкости были установлены 2 статистически значимые корреляции: с наличием Staphylococсus spp. (r = 0,392, р = 0,026) и Streptococcus spp. (r = –0,486, р = 0,005). Таким образом, метаболизм эндокринных дисрапторов, осуществляемый микробиотой, может сопровождаться дисбиозом урогенитального тракта – изменением количественного и качественного состава условно-патогенных микроорганизмов, что может приводить к ухудшению качества эякулята.

Статья опубликована в журнале «Андрология и генитальная хирургия» выпуск №4 2018, стр. 60-66

С помощью коэффициента ранговой корреляции Спирмена между концентрацией бисфенола A, триклозана в семенной жидкости и частотой выявления микроорганизмов в уретре у мужчин были обнаружены следующие статистически значимые корреляционные связи (табл. 2).

Задайте вопрос и получите качественную консультацию врачей. Для вашего удобства консультации доступны и в мобильном приложении. Не забывайте благодарить врачей, которые вам помогли! На портале действует акция «Поблагодарить – это просто!»

Вы врач и хотите консультировать на портале? Ознакомьтесь с инструкцией «Как стать консультантом».

Не занимайтесь самолечением. Только ответственный подход и консультация с медицинским специалистом поможет избежать негативных последствий самолечения. Вся информация, размещенная на портале Medihost, носит ознакомительный характер и не может заменить собой посещение врача. В случае возникновения каких-либо симптомов заболевания или недомогания следует обратиться к врачу в медицинское учреждение.

Подбор и назначение лекарственных препаратов может только медицинский работник. Показания к применению и дозировку лекарственных веществ необходимо согласовывать с лечащим врачом.

Медицинский портал Medihost является информационным ресурсом и содержит исключительно справочную информацию. Материалы о различных заболеваниях и способах лечения не могут использоваться пациентами для самовольного изменения плана лечения и назначений врача.

Администрация портала не берет на себя ответственности за материальный ущерб, а также ущерб здоровью нанесенный в результате использования информации, размещенной на сайте Medihost.

Чувствительность к антибиотикам определена?

Мне сказал врач, что невозможно определить чувствительность, т к анализ фемофлор выполняется методом пцр , и эти микроорганизмы не сеятся никакими другими способами. Это неправда ?

Антибиотики подбирались с учётом анализа на чувствительность флоры к ним?

Врач сказал , что чувствительность методом пцр не определяется, а обычным бак посевом эти микроорганизмы практически невозможно высеять, т к они моментально гибнут на открытом воздухе. Это неправда?

Здравствуйте Сдайте кровь на вэб ЦМВ Впг токсоплазму микоплазмы и хламидии респираторные методом ИФА igg м

Антибиотики подбирались с учётом анализа на чувствительность флоры к ним?

Норма Фемофлор-16 у женщин

Врачи часто назначают анализы и различные методы исследования, при этом не всегда толком объясняют их результаты. Либо девушка решила сама сделать анализ, и объяснить результаты некому. Если у вас похожая ситуация с фемофлор 16, разобраться в непонятных столбцах и строках поможет эта статья.

Читайте также:  На 9 неделя беременности покалывания ниже живота

Это лучший метод диагностики бактериальных заболеваний вагинальной флоры. Фемофлор 16 быстро и качественно определяет составные биоценоза урогенитального тракта у женщины, находит бактерии, нарушающие нормальную жизнедеятельность флоры и функционирования адекватной работы влагалища.

Почему эффективность метода лучше?

Фемофлор 16 давно оправдал свои надежды и превзошел другие методы исследования.

Этот анализ делается в режиме реального времени, тогда результат врач и пациент может получить уже через несколько часов. В сравнение — посев на флору влагалища проводится около недели. Это время необходимо для роста патогенной флоры и обнаружения колоний микроорганизмов.

Фемофлор 16 производится путем ПЦР (цепная полимеразная реакция), которая отличается особой чувствительностью и специфичностью.

Анализ берут без специальной подготовки. Единственным правилом правильной подготовки к анализу, чтобы он показал верное значение — соблюдение личной гигиены. Перед походом к врачу необходимо провести туалет наружных половых органов, так как скопление за ночь в естественных кожных складках наружных половых губ может привести к ложным результатам и неверному подсчету количества условно-патогенных и патогенных микроорганизмов.

Не рекомендуется проводить анализ во время менструаций. Так как кровь является лучшей средой обитания и возможности размножения патогенной флоры и просто притягивает нехорошие палочки и кокки.

Фемофлор 16 служит прекрасным методом определения эффективности проведенного лечения.

Показания к проведению анализа

  • Дискомфорт в области влагалища (жжение, зуд, боли в области малого таза);
  • Планирование беременности;
  • Невынашивание беременности;
  • Бесплодие;

Расшифровка анализа Фемофлор 16

Фемофлор 16 — расшифровка у женщин, норма — все это производится в лаборатории и по специальной таблице.

Расшифровка включает в себя следующие показатели:

  • Правильно ли и качественно собран материал на анализ;
  • Общая масса бактериальных микроорганизмов;
  • Наличие и количественный состав нормального населения влагалища;
  • Количественный состав условно-патогенных микроорганизмов;
  • Наличие и число патогенной флоры в исследуемом материале.

Определение качества забора материала определяется по составу эпителиальных клеток в мазке. В норме, если забор флоры произведен верно, эпителиальные клетки должны составлять не менее 10000 клеток. Тогда мазок собран правильно и в необходимом количестве.

Общее количество бактериальных микроорганизмов тоже должно иметь свою норму. Нижней границей общего числа бактерий служит 1 000 000 палочек и возможно кокков. Эта цифра должна находится в этих пределах, если подготовка женщины к забору мазка совершена верно.

Нормальную флору влагалища должны представлять лактобациллы. Они правящее население. В нормальных условиях лактофильные палочки должны количественно гораздо превышать остальные микроорганизмы, заселяющие внутреннюю среду влагалища. Они могут составлять от общего количества бактерий до 90%.

Условно-патогенная флора должна находиться в мазке, и всегда там присутствует, но должна иметь свои границы. Активный рост и повышенное количество может спровоцировать такую же болезнь, как и патогенные микроорганизмы. При диагностировании бактериального вагиноза, всегда число анаэробных организмов увеличено по отношению к норме.

Патогенные микроорганизмы должны отсутствовать вовсе. Они могут быть найдены и при относительном полном благополучии организма. Тогда они могут стать либо регулятором болезни при ослаблении иммунитета, либо провоцировать злокачественные новообразования.

Фемофлор 16 назвали не просто так. Этот анализ включает в себя наличие антител к нативной ДНК 16 микроорганизмов, которые могут заселять среду влагалища. Полученные данные собираются в таблицу, в которой указаны найденные бактерии, их количественный и качественный состав, нормальное значение цифр данных микроорганизмов в здоровой внутренней среде влагалища.

Таблица включает в себя следующие названия микроорганизмов:

  • Lactobacillus spp.
  • Streptococcus spp.
  • Enterobacterium spp.
  • Staphylococcus spp.
  • Gardnerella vaginalis + Prevotella bivia + Porphyromonas spp.
  • Eubacterium spp.
  • Leptotrichia spp. + Sneathia spp. + Fusobacterium spp.
  • Clostridium spp. + Lachnobacterium spp.
  • Megasphaera spp. + Dialister spp. + Veillonella spp.
  • Corinebacterium spp. + Mobiluncus spp.
  • Peptostreptococcus spp.
  • Mycoplasma genitalium
  • Atopobium vaginae
  • Candida spp.
  • Ureaplasma spp.
  • Micoplasma hominis

Значения полученных результатов

Spp — означает, что количественное значение указано не отдельного микроорганизма, а 1 группы — колонии бактерий.

После проведения компьютерного анализа полученных данных, данные указатели подаются в специальной таблице. Обычно результаты приходят на электронный адрес пациентки или находятся у врача в электронном или распечатанном виде.

Эти таблицы делятся на определенные группы. Сразу показана нормальная флора, затем строкой с подгруппой отделяются микроорганизмы с условно-патогенной флорой. Эта подгруппа носит название факультативно-анаэробные микроорганизмы. Затем следующей строкой ограничена следующая подгруппа условно-патогенной флоры, которая носит название облигатно-анаэробные микроорганизмы. Она отличается от предыдущей тем, что эти бактерии не могут жить без чужого организма и полностью являются паразитами хозяина, так как поддерживают свою жизнедеятельность полностью анаэробными процессами.

Следующая группа носит название микоплазмы, куда входят 2 микроорганизма: Mycoplasma hominis и группа Ureaplasma (urealyticum + parvum). Завершает таблицу результатов грибы Рода Кандида.

Результаты удобны тем, что числовые значения, написанные в первом столбце высчитываются в логарифмы — отношение высеянных бактерий к общей массе взятого мазка.

И в последнем столбце указываются не просто нормы в цифрах, а на сколько полученные результаты превышают или преуменьшают необходимые числа. То есть женщине не нужно сравнивать свои цифры с нормальными, а можно просто посмотреть на последний столбец и сразу увидеть норму или патологию.

Эффективность данного анализа не заставила себя ждать, и в настоящее время он первый среди подобных.

Не так давно миру был представлен новый метод диагностики ПЦР — полимеразная цепная реакция. Он сразу обрел свою значимость, так как относительно других, ранее используемых видов диагностики, ПЦР позволяет качественно и количественно определить бактериальную или вирусную флору в биологических жидкостях человека.

Методика Фемофлор была представлена на международном конгрессе в 2010 году. Россия разработала свою методику в 2014 году, за что получила премию в номинации «Призвание». Сейчас этот метод включен в новые разработки диагностических этапов в практике «акушерства и гинекологии».

Что такое Фемофлор

Фемофлор — это методика определения качественного и количественного состава флоры влагалища, основанное на методике полимеразной цепной реакции. Он позволяет наблюдать за изменениями биоценоза в «режиме реального времени».

С помощью данного метода можно:

  • определить общую бактериальную массу слизистой влагалища;
  • выполнить точный забор материала для дальнейшего бак посева на микроскопический метод;
  • получить количественные показатели нормофлоры;
  • количественно и качественно оценить факультативную флору влагалища, произвести соотношение с нормофлорой.

Как уже было сказано, основой определения биоценоза влагалища с помощью Фемофлор является метод полимеразной цепной реакции с дальнейшей амплификацией генетического материала (размножение ДНК).

Данный процесс требует определенной последовательности:

  • расплетение волокон нуклеиновых кислот (ДНК);
  • присоединение праймеров (затравки) для образования новых нуклеиновых кислот;
  • достраивание новой цепочки ДНК по типу комплементарности.

То есть амплификация работает подобно клеточному ядру. Она находит ДНК микроорганизма и выстраивает новые идентичные цепи для усиления поиска и качественного определения. Это позволяет использовать минимальное количество исследуемого материала для обнаружения патогенных микроорганизмов. Но построение ДНК вне организма требует специальных условий, созданных искусственно в лаборатории.

Для проведения метода требуются определенные материалы:

  • Матрица ДНК искомого микроорганизма;
  • Пара комплементарных праймеров (затравки) — стоп-кодоны;
  • ДНК-полимераза — необходима для активации реакции полимеризации (непосредственно амплификации);
  • Комплементарные дезоксирибонуклеофосфаты — строительные компоненты для новых цепочек ДНК;
  • Соли магния и буферный раствор — для максимальной схожести среды реакции, активации ферментативной активности.

Виды анализа

В разных лабораториях можно увидеть различные приставки к самому слову «Фемофлор». Есть Фемфлор 8 (9), Фемофлор Скрин, Фемофлор 4 и анализ Фемофлор 16 (17). По сути, это один и тот же метод, только включает дополнительные реактивы на другие микроорганизмы.

В таблице можно увидеть, какие именно микроорганизмы исследуют при том или ином наборе Фемофлор.

Рассмотрим подробнее каждого представителя:

  • Lactobacillus spp. — это представители нормальной флоры. Палочки составляют около 90% флоры влагалища в здоровом организме женщины. Это грамположительные условно анаэробные представители микрофлоры, которые способны вырабатывать молочную кислоту. Последний компонент поддерживает кислую среду во влагалище, что является основным фактором местного иммунитета.
  • Enterobacterium spp. — факультативные анаэробы, находятся в минимальном количестве в общей флоре, но тотальное размножение может стать причиной вагиноза.
  • Streptococcus spp. — условно-патогенная микрофлора, аналогична кишечной палочке, представители факультативных анаэробов, грамположительные кокки.
  • Staphylococcus spp. — факультативные анаэробы, также обладают грамположительными свойствами;
  • Gardnerella vaginalis — патогенная флора, которая является наиболее частой причиной развития вагиноза. Относится к факультативным анаэробам.
  • Eubacterium spp — бактериальные клетки, которые относятся к условно-патогенной флоре.
  • Leptotrihia spp./Sneathia spp./Fusobacterium spp. — факультативная флора влагалища, относится к строгим анаэробам, обладает грамотрицательными свойствами.
  • Veilonella spp./Megasphaera spp./Dialister spp. — строгие анаэробы, представители патогенных бактерий.
  • Clostridium spp./Lachnobacterium spp. — грамположительные палочки, относятся к эндогенным анаэробам. Являются представители патогенной флоры, способные вызвать заболевание даже в небольшой концентрации. Опасность состоит в возможности бактерий образовывать споры.
  • Mobyluncus spp./Corynebacterium spp. — грамположительные вибрионы, обладающие анаэробными свойствами.
  • Peptostreptococcus spp. — грамположительные кокковидные факультативные анаэробы.
  • Atopobium vaginae — его определение в крови или мазке из влагалища является маркерным знаком в обнаружении бактериального вагиноза. Это не значит, что именно он стал патогенным микроорганизмом. Палочка не имеет таких свойств. Его наличие свидетельствует о низком местном иммунитете и превалировании отличной от лактобацилл флоры.
  • Mycoplasma genitalium+hominis — внутриклеточный паразитарный организм, который не имеет своей клеточной стенки. В норме данный представитель должен отсутствовать в организме женщины.
  • Ureaplasma — в норме может обнаруживаться во влагалище, так как легко проникает из уретрального тракта в единичных количествах. Его жизнедеятельность не опасна для женщины в случае нормального состава биоценоза слизистой.
  • Candida spp. — кандидоподобный гриб, любое ослабление местного и общего иммунитета часто сопровождается развитием вагинального кандидоза («молочницы»).

Фемофлор скрин отличается от вышеописанных анализов наличием других реактивов, способных за одно посещение к врачу исключить такие венерические заболевания, как гонорею, генитальный герпес, цитомегаловирус, трихомониаз, микоплазмоз и хламидиоз.

Показания к проведению

В связи со стоимостью процедуры провести такой анализ не каждому по карману. Поэтому врачи не разбрасываются направлениями направо и налево.

Конечно, сдать даже для профилактики такой анализ не помешает, но существуют определенные показания, которые просто требуют проведения Фемофлора:

  • подготовка к нормальной физиологической беременности;
  • планирование беременности с помощью экстракорпоральных методов оплодотворения;
  • каждый триместр беременности;
  • поэтапный контроль лечения дисбиоза;
  • оперативное вмешательство на органах малого таза;
  • диагностика самопроизвольных выкидышей и невозможность забеременеть;
  • патологические примеси и выделения из влагалища;
  • неприятный постоянный запах из влагалища;
  • зуд и жжение во влагалище и уретральном канале;
  • расстройства мочеиспускания;
  • появление новообразований и высыпаний на половых губах;
  • болезненность внизу живота;
  • болезненность или отсутствие менструаций.

Проведение анализа

Подготовка к анализу позволяет исключить ложные результаты. Поэтому стоит обратить внимание.

В случае запланированного анализа без наличия установленного воспалительного процесса необходимо учитывать день менструального цикла. Анализ нужно брать с пятого дня цикла, включая период до последних 5 дней перед началом месячных.

За несколько суток, не менее 48 часов до, следует исключить проведение каких-либо процедур диагностического и лечебного характера (кольпоскопия, вагинальный осмотр, биопсия), а также половой акт.

За сутки до взятия биоматериала следует ограничить спринцевания, введение вагинальных суппозиториев. В случае применения антибиотикотерапии желательно прекратить прием лекарств. Или проводить Фемофлор через неделю после окончания лечения.

Еще одним условием является исключение средств для интимной гигиены. Не стоит вымываться мылом или гелем, так как смывается вся флора, не только патогенная, но и постоянная. Результаты анализа будут неверными. Перед процедурой и за сутки до взятия материала рекомендуют подмыться чистой теплой водой.

За 2-3 часа до проведения Фемофлора нельзя ходить в туалет. Лучше подумать об этом заранее. После опорожнения тоже подмыться простой водой.

Непосредственно сама процедура занимает несколько минут. Гинеколог во время проведения общего гинекологического осмотра берет слизь со стенок влагалища в виде мазка.

Читайте также:  Можно ли почувствовать на 9 неделе движение малыша

Обязательно взятие материала должно быть произведено до мануального исследования. В случае загрязненности влагалища, просвет нужно очистить с помощью стерильного тампона или салфетки. Материал берут непосредственно с заднего свода зондом.

Потом зонд отправляется в пробирку с питательной средой. Материал отправляется в лабораторию на анализ.

Процесс выявления бактерий занимает 1-3 рабочих дня.

Расшифровка анализов

Первым условием является контроль забора материала. Его определяют по общему числу бактерий. Пригодным образцом считают материал с наличием не менее 10 4 геном-эквивалентов на один образец. При наличии необходимого количества последних, расшифровка продолжается.

Далее определяется общая бактериальная масса. Она должна быть в пределах 10 6 — 10 8 единиц на образец. Данный пункт показывает общую обсемененность бактериями влагалища.

Основным показателем являются лактобактерии. По соотношению к общей массе ставят «чистоту» влагалища. То есть степень риска развития вагиноза. В идеале, нормальная флора содержит 80-100% лактобактерий. Такой показатель свидетельствует о высоком местном иммунитете и уверенности, что вагиноза нет.

Другие цифры свидетельствуют о наличии дисбиоза и снижении иммунитета: 20-60% — умеренный дисбиоз; до 20% — выраженный дисбиоз.

Условно-патогенная флора может присутствовать, но не должна превышать количество. В норме они составляют менее 1% от общей массы. 1-10% свидетельствуют об умеренном дисбиозе, более 10% — ярко выраженный.

Патогенная флора, такая как микоплазмы, уреоплазмы и кандиды, должна отсутствовать. Даже обнаружение в минимальном количестве говорит о наличии инфекции.

Megasphaera spp veillonella spp dialister spp у мужчин

mun.Chişinău, bd. Traian, 7/1 карта

(+373) 22 944 944 (+373) 69 944 944
Blvd. Traian 7/1, Chisinau

Бактериальный вагиноз (БВ) – инфекционный невоспалительный синдром, характеризующийся значительным снижением количества (или отсутствием) нормальной лактофлоры влагалища и ее заменой на полимикробные ассоциации строгих анаэробов. БВ – самая распространенная инфекция нижнего отдела мочеполовой системы у женщин детородного возраста. По данным различных авторов 25-30% женщин страдают этим заболеванием. Бактериальный вагиноз, по последним данным, является одной из причин раннего прерывания беременности, преждевременных родов, хориоамнионита, послеродового эндометрита, послеоперационных осложнений после гинекологических операций, воспалительных заболеваний малого таза у женщин. При бактериальном вагинозе увеличивается риск инфицирования половыми инфекциями, включая ВИЧ. Согласно последним рекомендациям ВОЗ 2005 г. бактериальный вагиноз относится к эндогенным инфекциям репродуктивного тракта человека (RTI).

Диагноз
Диагноз бактериального вагиноза ставится либо при определении клинико-лабораторных критериев Амселя, либо при определении баллов Нугента, либо при обнаружении так называемых высокоспецифичных маркеров (Atopobium vaginae, Clostridium spp.) бактериального вагиноза. В настоящее время, традиционным методом этиологической диагностики любого инфекционного процесса является культуральный метод. Однако этот способ имеет ряд серьезных недостатков:

  • Длительные сроки культивирования микроорганизмов (в среднем 5 дней).
  • Анаэробные микроорганизмы (наиболее часто встречаемые при БВ) трудно культивируются, либо не поддаются культивированию вообще.
  • При доставке материала в лабораторию с использованием транспортных сред продолжается размножение микроорганизмов с изменением их количественного соотношения.
  • В случае использования сухого тампона для взятия биоматериала, срок транспортировки образца в лабораторию ограничен часами (т.к. необходимо сохранить жизнеспособность).
  • Культуральный метод не дает точной количественной оценки и используется только для ориентировочной оценки соотношения микроорганизмов между собой.

Объективные и субъективные ограничения методов лабораторной диагностики, применяемых сегодня в мировой медицинской практике, приводят к большому количеству диагностических ошибок: при манифестированном БВ – более чем в 60%, при кандидозном вульвовагините – до 77%; при микст-инфекции – до 87% (Schwiertz A. et al. 2006). С другой стороны, невысокая чувствительность критериев Амселя и наличие бессимптомных форм бактериального вагиноза заставило искать другие методы и критерии подтверждения диагноза.
Достижения молекулярной биологии предоставили новые возможности в изучении микробного состава различных биотопов человека, обеспечивающие принципиально новый подход к исследованию условно-патогенной флоры, основанный на комплексной оценке основных групп микроорганизмов, формирующих урогенитальный биоценоз.
Новый метод исследования микробиоценоза влагалища методом ПЦР – уникальное исследование, позволяющее наиболее полно и точно охарактеризовать качественный и количественный состав биоценоза влагалища. Достоинством нового метода является возможность исследовать нормофлору, наличие, степень и характер дисбаланса условно-патогенной инормальной флоры.
В ходе исследования выполняется количественная оценка общей бактериальной массы, урогенитальной нормофлоры (лактобациллы) и комплекса аэробных и анаэробных микроорганизмов, микоплазм, грибов рода Candida, участвующих в развитии дисбиотических процессов в урогенитальном биоценозе.

Показания к применению метода

  • Наличие субъективных и/или объективных симптомов, связанных с урогенитальным трактом, у женщин репродуктивного возраста вне беременности
  • Планирование беременности
  • Репродуктивные потер
  • Подготовка к экстракорпоральному оплодотворению
  • Планируемое оперативное вмешательство в области малого таза

Данная технология предусматривает возможность анализа ряда показателей
Контроль взятия биоматериала
Общая бактериальная масса
Нормобиота

Аэробные микроорганизмы (факультативные анаэробы)

  • Enterobacterium spp.
  • Streptococcus spp.
  • Staphylococcus spp.

Анаэробные микроорганизмы (строгие анаэробы)

  • Gardnerella vaginalis/Prevotella bivia
  • Porphyromonas spp.
  • Eubacterium spp.
  • Sneathia spp./Leptotrihia spp.
  • Fusobacterium spp.
  • Megasphaera spp.
  • Veilonella spp./Dialister spp.
  • Lachnobacterium spp./Clostridium spp.
  • Mobiluncus spp./Corynebacterium spp.
  • Peptostreptococcus spp.
  • Atopobium vaginae
  • Mycoplasma (hominis +genitalium)
  • Ureaplasma (urealyticum + parvum)

Интерпретация полученных результатов

НОРМОЦЕНОЗ
Общая бактериальная масса (ОБМ) – показатель, по которому можно судить об общем количестве бактерий, присутствующих в исследуемой биопробе. Основным представителем нормобиоты урогенитального тракта у здоровых женщин репродуктивного возраста являются представители рода Lactobacillus (LB). LB оцениваются как в абсолютных, так и относительных показателях.
В норме LB являются главной составляющей ОБМ, поэтому абсолютный показатель уровня лактобацилл практически не отличается от абсолютного показателя общей бактериальной массы и соответствует 10 6 –10 8 для вагинальных соскобов, для уретры и цервикального канала – на порядок меньше – 10 5 – 10 7 .
Снижение относительного показателя LB служит одним из критериев дисбаланса урогенитальной биоты. Умеренное снижение относительного показателя LB соответствует интервалу значений от -0,3 до -1,0 (70%-10% от ОБМ). Значительное снижение относительного показателя ЛБ соответствует значениям ниже, чем -1,0 (меньше 10% от ОБМ). Снижение ОБМ ниже указанных пороговых значений, соответственно, свидетельствует о недостаточном заселении исследуемого биотопа бактериями, возможно вследствие антибиотикотерапии, гипоэстрогении различного генеза и др.

Аэробные и анаэробные условно-патогенные микроорганизмы
Абсолютный показатель 4 , относительный показатель – меньше -3 (0,1%), отдельные представители условно-патогенной микрофлоры могут иметь относительный показатель от -3 до -2 (0,1%-1%) – слабо увеличенный уровень.

Mycoplasma hominis и Ureaplasma (urealyticum+parvum)
Отсутствуют или их абсолютный показатель 4 .

Грибы рода Candida
Отсутствуют или их абсолютный показатель 3 .

ДИСБАЛАНС I (умеренный)
Общая бактериальная масса
Абсолютный показатель 10 6 -10 8 для влагалища, 10 5 -10 7 – для уретры и цервикального канала.

Нормобиота (Lactobacillus spp.)
Абсолютный показатель 10 6 -10 8 , 10 5 -10 7 – для уретры и цервикального канала; относительный показатель – от -0,3 до -1 (70%-10%).

Аэробные и анаэробные условно-патогенные микроорганизмы
Абсолютный показатель >10 4 , относительные показатели различных условно-патогенной микрофлоры варьируют от -3 до -1 (0,1%-10%).

Mycoplasma hominis и Ureaplasma (urealyticum + parvum)
В норме отсутствуют или абсолютный показатель > 10 4 .

Грибы рода Candida spp.
В норме отсутствуют или абсолютный показатель > 10 3 .

ДИСБАЛАНС II (выраженный)
Общая бактериальная масса
Абсолютный показатель варьирует в широких пределах, он может быть как меньше 10 5 , так и соответствовать норме (10 6 -10 8 ) в зависимости от этиологии и патогенеза урогенитального заболевания. Как правило, во влагалище ОБМ на 1 порядок выше, чем в уретре или цервикальном канале.

Нормобиота (Lactobacillus spp)
Абсолютный показатель может варьировать от полного отсутствия лактобацилл до значений 10 5-6 (как правило во влагалище количество лактобацилл на 1 порядок выше, чем в уретре и цервикальном канале); относительный показатель – меньше -1 (0-10%).

Аэробные и анаэробные условно-патогенные микроорганизмы
В большинстве случаев абсолютный показатель больше >10 5 , относительные показатели различных представителей условно-патогенной микрофлоры могут варьировать от -3 до 0 (0,01%-100%), однако относительные показатели хотя бы её части находятся в пределах от -1 до 0 (10%-100%).

Mycoplasma hominis и Ureaplasma (urealyticum + parvum)
Могут отсутствовать или абсолютный показатель >10 4 .

Грибы рода Candida spp.
Отсутствуют или абсолютный показатель > 10 3 .

Классификация дисбалансов в зависимости от этиологической структуры

Анаэробный
Дисбаланс, вызванный преимущественно анаэробными микроорганизмами: Gardnerella vaginalis /Prevotella bivia/Porphyromonas spp; Atopobium vaginae; Eubacterium spp; Sneathia spp /Leptotrihia spp/Fusobacterium spp; Megasphera spp/Veilonella spp/Dialister spp; Lachnobacterium spp/Clostridium spp; Mobiluncus spp/Corynebacterium spp; Peptostreptococcus spp.

Аэробный
Дисбаланс, вызванный преимущественно аэробными микроорганизмами: Enterobacteraceae, Streptococcus spp и Staphylococcus spp.

Смешанный
Дисбаланс, вызванный сочетанием аэробной и анаэробной бактериальной биоты, возможно в сочетании с дрожжевыми грибами рода Candida.

В методе предусмотрена возможность контроля качества взятия материала. Данный показатель служит для оценки правильности взятия материала врачом-клиницистом и позволяет отличать случаи биоценозов со сниженной бактериальной массой, от случаев некорректного взятия материала. Это исключает также получение ложноотрицательных результатов исследования.
Программное обеспечение позволяет автоматически анализировать полученные данные и выдавать заключение в удобном для интерпретации виде. Метод предназначен как для повседневной лабораторной диагностики, так и в качестве чувствительного и высокоспецифичного инструмента для научных исследований.

61-93-230. Андрофлор (соскоб из уретры)

Номенклатура МЗРФ (Приказ №804н): A26.21.036.002 «Андрофлор, определение ДНК возбудителей инфекции передаваемые половым путем в соскобе эпителиальных клеток из уретры методом ПЦР»

Биоматериал: Соскоб из уретры

Срок выполнения (в лаборатории): 1 р.д. *

Оценка микрофлоры урогенитального тракта у мужчин играет важную роль в диагностике репродуктивной функции. Исследование «Андрофлор» предназначено для установления этиологии инфекционно–воспалительных процессов мочеполового тракта мужчин, которое основано на проведении ПЦР в реальном времени. Исследование дает возможность определить микроорганизмы, которые невозможно выявить при бактериологических посевах. Комплекс «Андрофлор» предназначен для диагностики и мониторинга эффективности лечения любых инфекционно-воспалительных заболеваний мочеполовой системы у мужчин, выявления ДНК патогенных микроорганизмов, количественной оценки грибов рода Candida, урогенитальной нормобиоты, широкого условно-патогенной микрофлоры с целью этиологической диагностики. Анализ берется из предполагаемых мест локализации инфекций.

В состав исследования входят:

Геномная ДНК человека / Общая бактериальная масса / Lactobacillus spp. / Staphylococcus spp. / Streptococcus spp. / Corynebacterium spp. / Gardnerella vaginalis / Atopobium cluster / Megasphaera spp.+Veilonella spp.+Dialister spp. / Sneathia spp.+Leptotrihia spp.+Fusobacterium spp / Ureaplasma urealyticum / Ureaplasma parvum / Mycoplasma hominis / Bacteroides spp.+Porphyromonas spp.+Prevotella spp. / Anaerococcus spp. / Peptostreptococcus spp.+Parvimonas spp., Eubacterium spp. / Pseudomonas aeruginosa+Ralstonia spp.+Burkholderia spp. / Heamophilus spp / Enterobacteriaceae spp.+Enterococcus spp. / Candida spp. / Mycoplasma genitalium / Trichomonas vaginalis / Neisseria gonorrhoeae / Chlamydia trachomatis *КВМ — Контроль взятия материала

Показания к назначению

  • этиологическая диагностика уретрита, баланопостита;
  • мониторинг терапии уретрита, баланопостита; симптомы воспалительных заболеваний урогенитального тракта.

Подготовка к исследованию

Перед взятием биоматериала рекомендуется воздержаться от мочеиспускания в течение двух часов. При наличии обильных уретральных выделений клинический образец получают через 15-20 минут после мочеиспускания. Не рекомендуется сдавать биоматериал ранее, чем через 2 недели после применения лекарственных препаратов (антибиотики, пробиотики, эубиотики). Воздержаться от половых контактов в течение 3-хдней до исследования.

Интерпретация результатов/Информация для специалистов

За интерпретацией результатов исследования необходимо обратиться к врачу. Индивидуальный бланк ответа и первичная трактовка результата проводится в лаборатории автоматически. Результаты исследований выдаются в табличной форме и в виде гистограммы.

Геномная ДНК человека (ГДЧ) оценивается в абсолютных значениях, служит для подтверждения наличия в пробирке человеческого биоматериала. Минимальное пороговое значение 10/3.

Общая бактериальная масса (ОБМ) – бактериальная обсемененность биотопа – абсолютный показатель количества бактерий, с которым сравнивают все определяемые бактерий/группы бактерий, минимальное пороговое значение – 10/4.

В случае, если в образце биоматериала одновременно ОБМ и ГДЧ ниже пороговых значений, анализ микрофлоры не проводится. В этом случае рекомендуется повторить взятие биоматериала.

Транзиторная микрофлора: Lactobacillus spp. Относительный показатель, служит маркером наличия в половых путях транзиторной микрофлоры, попадающей в половые пути от половой партнерши. При диагностике острых заболеваний нижних отделов МПС может служить косвенным маркером того, что причиной заболевания является транзиторная микрофлора. Пороговое значение – 10% от ОБМ. При повышении порогового значения Lactobacillus spp. Количественно-качественная оценка микрофлоры не проводится и заключение не выдается. В этом случае требуется повторное взятие биоматериала при условии отсутствия незащищенных половых контактов в течение трех дней.

Нормофлора: Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Corynebacterium spp. Сумма количества микроорганизмов нормофлоры – относительный показатель, снижение которого трактуется как дисбиоз. Низкая общая бактериальная масса (ОБМ 10/3) трактуется как НОРМОЦЕНОЗ. Если нормофлора составляет большую часть ОБМ, а относительное количество УПМ ниже пороговых значений, структура микробиома оценивается как НОРМОЦЕНОЗ.

Читайте также:  Можно пить омегу кормящей

Условно-патогенные микроорганизмы (УМП). Показатель оценивается в относительных значениях. Относительное количество УМП и/или группы УМП выше пороговых значений свидетельствует об их участии в развитии дисбиоза.

Дрожжеподобные грибы: Candida spp. Показатель оценивается в абсолютных значениях, клинически значимое пороговое значение – 10/4.

Патогены: Mycoplasma genitalium, Trichomonas vaginalis, Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis. Качественный показатель, оценивается наличие или отсутствие микроорганизма.

Образец бланка с результатами:

1. Непосредственно перед взятием материала наружное отверстие уретры обработать тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором.

2. При наличии гнойных выделений соскоб рекомендуется брать через 15-20 мин после мочеиспускания.

3. При отсутствии выделений необходимо провести массаж уретры с помощью зонда для взятия материала. Ввести зонд на глубину 3-4 см, собрать материал осторожными вращательными движениями.

4. Погрузить зонд в пробирку с 0,5-1,0 мл физиологического раствора, несколько раз вращать и, отжав остатки раствора о стенки, удалить из пробирки. Пробирку плотно закрыть и промаркировать. Оставлять наконечник зонда в пробирке не рекомендуется!

Где сдать анализ?

Конечно, сдать даже для профилактики такой анализ не помешает, но существуют определенные показания, которые просто требуют проведения Фемофлора:

Megasphaera cerevisiae .
Взято из: Haikara A. 1991. In Balows et al.
The Prokaryotes, 2nd edn, V. II, Springer, New York

Мегасфера (Megasphaera) — род грамотрицательных анаэробных неподвижных коккообразных условно-патогенных бактерий, возбудителей заболеваний урогенитального тракта человека, в частности бактериального вагиноза. Относится к так называемым вагиноз-ассоциированным бактериям.

Megasphaera входят в резидентную микрофлору толстой кишки человека. В процессе жизнедеятельности Megasphaera продуцируют короткоцепочечные жирные кислоты: масляную, изомасляную, валериановую, капроновую, изовалериановую, изокапроновую (Акопян А.Н.).

Megasphaera в классификации бактерий

По современной классификации род Megasphaera входит в семейство Veillonellaceae, порядок Veillonellales, класс Negativicutes, тип Firmicutes, Terrabacteria group, царство Бактерии.

Ранее род Megasphaera относился к не существующему ныне семейству Acidaminococcaceae, которое входило в порядок Clostridiales. Позже род Megasphaera был включён в семейство Veillonellaceae (ранее входящее в порядок Clostridiales, класс Clostridia, тип Firmicutes, царство Бактерии).

К роду Megasphaera относятся следующие виды: Megasphaera cerevisiae, Megasphaera elsdenii, Megasphaera cf. elsdenii, Megasphaera hexanoica, Megasphaera hominis, Megasphaera indica, Megasphaera massiliensis, Megasphaera micronuciformis, Megasphaera paucivorans, Megasphaera sueciensis.

Ранее род Megasphaera относился к не существующему ныне семейству Acidaminococcaceae, которое входило в порядок Clostridiales. Позже род Megasphaera был включён в семейство Veillonellaceae (ранее входящее в порядок Clostridiales, класс Clostridia, тип Firmicutes, царство Бактерии).

С.В. Чигринец 1, 2 , Г.В. Брюхин 1

1 ФГБОУ ВО «Южно-Уральский государственный медицинский университет» Минздрава России; Россия, 454092 Челябинск, ул. Воровского, 64;
2 ООО «ДНК клиника»; Россия, 454048 Челябинск, ул. Яблочкина, 3

Бесплодие – важная медико-социальная проблема. Известно, что мужской фактор (патозооспермия – нарушение качества эякулята) выявляют примерно в 50 % бесплодных пар, причем на долю идиопатической формы мужского бесплодия приходится не менее 30 %, а доля бессимптомной урогенитальной инфекции, по данным E. Nieschlag [1], составляет 8 %. Среди вероятных причин идиопатической формы бесплодия рассматриваются: генетические факторы, воздействие активных форм кислорода и эндокринных дисрапторов [1].

Связь условно-патогенной урогенитальной инфекции с качеством эякулята широко изучается в настоящее время с помощью полимеразной цепной реакции, хроматографии с масс-спектрометрией или высокопроизводительного секвенирования (next-generation sequencing) [2–4]. Хорошо известна роль условно-патогенных микроорганизмов в метаболизме ксенобиотиков [5, 6], а также их способность вызывать гибель клеток, в частности апоптоз сперматозоидов [7–9]. Вместе с тем отсутствуют убедительные данные о том, при каких условиях условно-патогенная микрофлора урогенитального тракта способна оказывать влияние на качество эякулята и становиться причиной мужской субфертильности или инфертильности.

Влияние на качество эякулята убиквитарных эндокринных дисрапторов, к которым относятся бисфенол А и триклозан, активно обсуждается в научной литературе [10–12]. Однако нам не встретились публикации, посвященные изучению связи между микробиотой урогенитального тракта, эндокринными дисрапторами и фертильностью мужчины.

Цель исследования – установить связь между наличием условно-патогенных микроорганизмов уретры и качеством эякулята, а также концентрацией убиквитарных эндокринных дисрапторов (бисфенола А и триклозана) в семенной жидкости.

Материалы и методы

С октября 2017 г. по сентябрь 2018 г. на базе «ДНК клиники» (Челябинск) проведено обсервационное одноцентровое одномоментное (поперечное) неконтролируемое исследование с участием 63 мужчин. Пациенты обратились в клинику для выполнения спермиологического анализа по поводу бесплодия в браке, невынашивания беременности партнершей, а также для планирования беременности или донорства спермы. Все пациенты были жителями Челябинска или Челябинской области

Критерии включения в исследование: мужской пол, возраст 20–40 лет, наличие идиопатической формы бесплодия, наличие репродуктивных потерь у супружеских пар с патозооспермией, бессимптомный дисбиоз уретры, планирование беременности супружескими парами с нормозооспермией, участие в донорстве спермы, информированное добровольное согласие на включение в исследование.

Критерии исключения из исследования: варикоцеле, инфекционно-воспалительные заболевания урогенитального тракта, вызванные патогенными и/или условно-патогенными микроорганизмами, лейкоспермия, MAR-тест >10 % по данным спермограммы, азооспермия, гипогонадизм и другие эндокринные заболевания, онкологические заболевания любой локализации, ВИЧ-инфекция, системные заболевания, отсутствие информированного добровольного согласия на включение в исследование.

Проводили лабораторное исследование эякулята и содержимого уретры. Эякулят собирали после 3–4 дней воздержания от семяизвержений. Забор содержимого уретры для исследования на наличие инфекции и воспаления осуществляли не менее чем через 3 ч после последнего мочеиспускания. Для исключения патологий органов мошонки (варикоцеле и др.) выполняли ультразвуковое исследование органов мошонки на аппарате Mindray DC-7 (Китай) в положении пациента лежа и стоя во время андрологического приема.

У всех пациентов проведено спермиологическое исследование с оценкой общего количества, концентрации, подвижности, морфологии сперматозоидов по Крюгеру. Спермиологическое исследование выполняли в соответствии с рекомендациями Всемирной организации здравоохранения (2010) [13]. Заключение о наличии нормозооспермии или патозооспермии основывали на критериях, изложенных в тех же рекомендациях [13].

По результатам оценки качества 63 образцов эякулята мужчины были распределены по 2 группам: в 1-ю вошли пациенты с нормозооспермией (n = 27), во 2-ю – с патозооспермией (n = 36).

  • «нормальная микрофлора» (Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Corynebacterium spp., а также были включены Lactobacillus spp.);
  • «условно-патогенные микроорганизмы, ассоциированные с бактериальным вагинозом» (Gardnerella vaginalis, Megasphaera spp./Veilonella/Dialister spp., Sneathia spp./Leptotrichia spp./Fusobacterium spp., Ureaplasma parvum, Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma hominis и Atopobium cluster);
  • «условно-патогенные анаэробы» (Anaerococcus spp., Bacteroides spp./Porphyromonas spp./Prevotella spp., Peptostreptococcus spp./Parvimonas spp., Eubacterium spp.).

Haemophilus spp., Pseudomonas aeruginosa/Ralstonia spp./ Burkholderia spp., Enterobacteriaceae spp./Enterococcus spp., а также Candida spp. ввиду их малочисленности в изучаемых образцах не позволили сформировать отдельный кластер и поэтому в статистический анализ не вошли.

Концентрацию бисфенола А и триклозана в семенной жидкости определяли на газовом хроматографе с масс-спектрометром Shimadzu GCMS-QP2010 Ultra (Shimadzu Corporation, Япония). Данные обрабатывали с помощью программы GCMSsolution 4.3 (Shimadzu Corporation, Япония).

Среди 63 пациентов, которые приняли участие в исследовании, было 27 (42,9 %) мужчин с нормозооспермией (планирующих беременность в браке или доноров спермы) и 36 (57,1 %) мужчин с идиопатической формой бесплодия и/или репродуктивными потерями в супружеской паре с различными вариантами патозооспермии: тератозооспермией – в 18 (50 %) случаях, астенотератозооспермией – в 12 (33,3 %), олиготератозооспермией – в 4 (11,1 %), олигоастенотератозооспермией – в 2 (5,6 %).

Средний возраст пациентов (М ± σ) составил 30,8 ± 3,6 года, средний индекс массы тела (ИМТ) (М ± σ) – 25,4 ± 2,9 кг/м2 , при этом 42 % мужчин имели избыточную массу тела (ИМТ 25–30 кг/м2 ) и 11 % – ожирение I степени (ИМТ >30 кг/м2 ). Группы пациентов с нормо- и патозооспермией были сопоставимы по возрасту, длительности воздержания от семяизвержений, ИМТ, статусу курения и приема алкоголя.

В 100 % образцов эякулята был обнаружен бисфенол А с медианной концентрацией 0,150 (0,060– 0,310) нг/мл. Триклозан был выявлен в 84,9 % образцов эякулята с медианной концентрацией 0,125 (0,050– 0,220) нг/мл.

Группы статистически значимо различались по концентрации бисфенола А (p 0,1), за исключением Atopobium cluster (p = 0,031), входившего во 2-й кластер.

Обращает на себя внимание тот факт, что у мужчин с патозооспермией частота выявления микробиоты 1-го кластера (Lactobacillus spp., Staphylococсus spp. и Corynebacterium spp.) была несколько выше, чем у мужчин с нормозооспермией. Микроорганизмы, включенные во 2-й кластер (Gardnerella vaginalis, Megasphaera spp./Veilonella/Dialister spp., Sneathia spp./Leptotrichia spp./Fusobacterium spp., Ureaplasma parvum, Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma hominis и Atopobium cluster), встречались чаще у мужчин с нормозооспермией, тогда как микроорганизмы 3-го кластера (Anaerococcus spp., Bacteroides spp./Porphyromonas spp./ Prevotella spp., Peptostreptococcus spp./Parvimonas spp., Eubacterium spp.) несколько чаще встречались у мужчин с патозооспермией.

С помощью коэффициента ранговой корреляции Спирмена между концентрацией бисфенола A, триклозана в семенной жидкости и частотой выявления микроорганизмов в уретре у мужчин были обнаружены следующие статистически значимые корреляционные связи (табл. 2).

Таблица 2. Статистически значимые корреляционные связи между концентрацией бисфенола А, триклозана в семенной жидкости и обсемененностью уретры микроорганизмами

Эндокринный дисраптор Микроорганизм Корреляционная связь r p
Бисфенол А Lactobacillus spp 0,501 0,003
Corynebacterium spp. 0,425 0,015
Anaerococcus spp. 0,371 0,037
Eubacterium spp. 0,357 0,045
Триклозан Staphylococсus spp. 0,392 0,026
Streptococcus spp. –0,486 0,005

В данном исследовании был использован метод полимеразной цепной реакции в режиме реального времени для характеристики разнообразия микробиоты уретры. Результаты показали отсутствие статистически значимых различий между группами мужчин с нормозооспермией и патозооспермией по составу микробиоты уретры. D. Hou и соавт. (2013) также не обнаружили статистически значимых различий при сравнении микробиоты у доноров спермы и бесплодных мужчин [14]. В их работе была выявлена отрицательная статистически значимая корреляция между качеством эякулята и наличием Anaerococcus, но в нашем исследовании Anaerococcus spp., наряду с другими анаэробными микроорганизмами (Bacteroides spp./Porphyromonas spp./Prevotella spp., Peptostreptococcus spp./Parvimonas spp., Eubacterium spp.), также встречался чаще у мужчин с патозооспермией, хотя связь и оказалась статистически незначимой. S.-L. Weng и соавт. [2] продемонстрировали положительную статистически значимую корреляцию качества эякулята с наличием Lactobacillus и Gardnerella vaginalis и отрицательную – с наличием Prevotella, что подтвердилось и в нашем исследовании. Из микроорганизмов, традиционно выявляемых в микробиоценозе влагалища, статистически значимо чаще в уретральном микробиоценозе у мужчин с нормозооспермией присутствовала Atopobium cluster.

Исходя из этого, следует предположить, что условно-патогенные микроорганизмы, ассоциированные с бактериальным вагинозом, можно рассматривать при дальнейшем изучении микробиоты урогенитального тракта у мужчин как биомаркеры хорошего качества эякулята, а условно-патогенные анаэробы – наоборот, как биомаркеры низкого качества эякулята. Вместе с тем в ходе исследования была обнаружена тенденция к повышению уровня общей бактериальной обсемененности уретры с сокращением ее видового разнообразия у мужчин с патозооспермией, что согласуется с данными других авторов [4]. В нашей работе впервые была описана статистически значимая связь между концентрацией бисфенола А, триклозана в семенной жидкости и характеристиками микробиоты уретры. В некоторых публикациях также было показано отрицательное влияние эндокринных дисрапторов на микробиоту организма человека [6, 15].

В ходе исследования установлены статистически значимые различия в концентрации бисфенола А и триклозана в семенной жидкости у мужчин с нормо- и патозооспермией. Обнаружены статистически значимые положительные корреляции между концентрацией бисфенола А в семенной жидкости и наличием вмикробиоте уретры Lactobacillus spp. (r = 0,501, р = 0,003), Corynebacterium spp. (r = 0,425, р = 0,015), Anaerococcus spp. (r = 0,371, р = 0,045), Eubacterium spp. (r = 0,357, р = 0,037). В отношении концентрации триклозана в семенной жидкости были установлены 2 статистически значимые корреляции: с наличием Staphylococсus spp. (r = 0,392, р = 0,026) и Streptococcus spp. (r = –0,486, р = 0,005). Таким образом, метаболизм эндокринных дисрапторов, осуществляемый микробиотой, может сопровождаться дисбиозом урогенитального тракта – изменением количественного и качественного состава условно-патогенных микроорганизмов, что может приводить к ухудшению качества эякулята.

Статья опубликована в журнале «Андрология и генитальная хирургия» выпуск №4 2018, стр. 60-66

Концентрацию бисфенола А и триклозана в семенной жидкости определяли на газовом хроматографе с масс-спектрометром Shimadzu GCMS-QP2010 Ultra (Shimadzu Corporation, Япония). Данные обрабатывали с помощью программы GCMSsolution 4.3 (Shimadzu Corporation, Япония).

http://www.uroweb.ru/article/svyaz-mikrobioti-uretri-s-kachestvom-eyakulyata-i-soderganiem-endokrinnih-disraptorov-v-semennoy-gidkosti-u-mugchinhttp://medihost.ru/questions?id=133142http://onji.ru/kormyashhaya-mama/megasphaera-spp-veillonella-spp-dialister-spp-u-muzhchin.htmlhttp://www.gastroscan.ru/handbook/118/8746http://www.uroweb.ru/article/svyaz-mikrobioti-uretri-s-kachestvom-eyakulyata-i-soderganiem-endokrinnih-disraptorov-v-semennoy-gidkosti-u-mugchin

Давайте вместе будем делать материал еще популярнее, и после его прочтения сделаем репост в удобную для Вас социальную сеть.

Оцените статью
Воспитание и рождение детей - лучшие советы маме